2- ملاحظة عملية الاستنساخ بالمجهر الالكتروني:
الوثيقة 2 ص 17 :
1- من تحليل هذه الوثيقة يتضح أن عملية الاستنساخ تمت من الأسفل نحو الأعلى.
التعليل :
- عند بداية الاستنساخ يكون طول ARN المستنسخ قصيرا و يزداد الطول مع تقدم عملية الاستنساخ، لذلك عند بدية المورثة يكون طول ARN المستنسخ صغيرا ثم يزداد طولة تدريجيا و بالاقتراب من نهاية المورثة يصل إلى أكبر طول ممكن.
- يبدأ إنزيم ARN بوليمراز باستنساخ المورثة من بدايتها و لا يمكن أن يبدأ من أي مكان آخر و لا تتوقف عملية الاستنساخ إلا بالوصول إلى نهاية المورثة.
- يتم الاستنساخ في الاتجاه من 3 فتحة إلى 5 فتحة
2- أ : جزيء ADN ب : جزيء ARN
3- إظهار دور إنزيم ARN بوليمراز :
الوثيقة 3 ص 17 :
التحليل :
يعبر المنحنى عن تغير كمية ARN المستنسخة بدلالة تركيز مادة aأمانيتين المثبطة لنشاط إنزيم ARN بوليمراز في الوسط.
- إذا كان تركيز α أمانتين أصغر من3 10-ميكروغرام/مل:
هذا التركيز ضعيف غير كاف لتثبيط نشاط ARN بوليمراز، لذلك كمية ARNmالمستنسخة أعظمية.
- إذا كان تركيز α أمانتين أكبر من3 10-ميكروغرام/مل:
يزداد تثبيط إنزيم ARN بوليمراز بزيادة تركيزαأمانتين مما ينعكس سلبا على كمية ARNmالمستنسخة، حيث تتناقص بسرعة كبيرة محققة أدنى نسبة لما يصل التركيز إلى 1 ميكروغرام/مل.
المعلومة المستخرجة
ARN بوليمراز هو الإنزيم المسؤول عن عملية الاستنساخ
4- تفاصيل آلية حدوث عملية الاستنساخ :
الوثيقة 4 ص 184 :
1- العناصر الضرورية لحدوث عملية الاستنساخ :
المورثة – إنزيم ARNP بوليمراز –النيكليوتيدات الضرورية للعملية (ATP-CTP- GTP UTP).
2- مراحل حدوث عملية الاستنساخ :
تتم عملية الاستنساخ كما يلي:
- مرحلة الانطلاق
يتثبت إنزيمARNP على منطقة البداية بعد أن يتعرف عليها و بذلك يصل إلى بداية المورثة، لا يستنسخARNP منطقة البداية.
يقوم إنزيم ARNPبفتح حلزون ADN في بداية المورثة و ذلك بكسر الروابط الهيدروجينية بين القواعد الآزوتية و يتعرف على السلسلة المستنسخة و يتثبت عليها و يبدأ في استنساخها.
ينزلق إنزيم ARNPعلى سلسلة ADN المستنسخة في من 3 فتحة إلى 5 فتحة بحيث يركب سلسلة مكملة للسلسلة المستنسخة لكن باستخدام Uبلا من T
- مرحلة الاستطالة
يستمر فيها إضافة نيكليوتيدات جديدة لجزيء ARNmالمتشكل و ذلك طبيعي لاستمرار انزلاق ARNPعلى سلسلةADN المستنسخة إلى غاية وصوله إلى نهاية المورثة.
- مرحة النهاية
عندما يصل ARNPإلى منطقة النهاية يتوقف عن استنساخ المورثة و ينفصل عنها ثم ينفصل عنه جزيء ARNmالمتشكل.
لا يبق جزيء ADN مفتوحا بل يغلق تدريجيا مع تقدم عملية الاستنساخ.
5- العلاقة بين ADN و ARNmالمستنسخ :
الوثيقة 5 ص 18 :
يكون جزيء ARNmمكملا للسلسلة المستنسخة من ADNو مطابقا للسلسة غير المستنسخة مع مراعاة استبدال التايمينT باليوراسيل U
6- نضج ARNmبعد انتهاء الاستنساخ :
الوثيقة 7 :
تبين هذه الوثيقة نتائج التهجين الجزيئي بين السلسلة المستنسخة من ADNو ARN الناتج عن عملية الاستنساخ المأخود من الهيولى.
- بعض المناطق من السلسلة المستنسخة لا يوجد ما يقابلها في خيط ARNmسلسلة ADN أطول من ARNm
- بينت تجارب التهجين الجزيئي بين السلسلة المستنسخة من ADNو ARN الناتج المأخوذ من النواة أن الجزيئين متساويين في الطول.
- يسمى ARNm الناتج مباشرةعن عملية الاستنساخ بـ ARNmالطلائعي (الأولي)، أما ARNmالذي يوجد في الهيولى فيسمى ARNmالناضج.
- تطرأ تغير على ARNmالطلائعي في النواة فيتحول إلى ناضج. تتمثل تلك التغيرات في حذف بعض القطع منه و ربط القطع المتبقية مع بعضها البعض. تتم هذه العمليات بتدخل إنزيمات متخصصة.
- القطع المستبعدة من ARNmالطلائعي هي القطع التي تقابل القطع الداخلية في جزيء ADNو القطع المتبقية التي تربط مع بعضها البعض تعرف بالقطع الخارجية.